聚丙烯酰胺水凝胶软组织填充剂

　　试验结果表明,奥美定注射点于1小时、24小时、48小时观察为约Φ5mm、高0.2mm的皮丘,但无红斑、水肿现象,致敏率为0,与0.9%生理盐水(阴性对照组)无明显差异,致敏率<8%为Ⅰ度,而5%甲醛溶液(阳性对照组)的注射点出现红斑、水肿,甚至注射点局部出现硬结和焦痂的现象,致敏率为100%为Ⅴ度。因而,奥美定无皮肤致敏性。
　　4　讨论接触性过敏反应是一种对致敏动物产生免疫学传递的皮肤反应[4]。关键是半抗原必须存在于皮肤并向里渗透,与皮肤蛋白质结合后具抗原性。存在于表皮与真皮接缘处的郎罕氏细胞将抗原传递给特异型淋巴细胞,其中一部分具有长寿命的记忆细胞,在激发阶段作为原始活性因子,这样,以后再接触同一抗原时,致敏的淋巴细胞释放淋巴因子,吸引其他炎细胞至局部反应,导致一系列的有害反应。
　　本试验中采用的皮内注射的方法,避开了免疫系统成分(郎罕氏细胞),可以重新组合致敏物,具有较高的可靠性,是致敏试验中首选之方法。
　　近20年里,随着分子生物学、免疫学的发展及诊疗水平的提高和对生命质量的关注,人们正寻求一种无毒、无致敏、无遗传毒性不被吸收新的注射用填充剂,以取代硅凝胶、液体硅胶、胶原等老一代填充剂,奥美定在致敏试验中各注射点于48小时内呈皮丘状,可能由于水凝胶未被组织吸收,这正符合软组织填充剂的要求,而它的无致敏性给整形外科带来曙光,是一种具有广阔应用前景的医用生物材料。　　随着现代科学技术的发展,用于整形外科临床上的填充材料也迅速发展起来。医用聚丙烯酰胺水凝胶软组织填充剂(奥美定)是一种亲水性强、无色透明的聚合物类水凝胶[1],用于体表和体内的各种组织凹陷性缺损的填充,在工艺制作中采用了各种化学试剂,这些低分子物质如未处理干净,进入体内便会激活免疫系统,作为一种抗原或半抗原,产生过敏反应,对人体造成危害,因而,为了保证临床使用的安全性,检测是否有致敏作用成为评价奥美定生物产品安全性的重要内容[2]。
　　1　试验材料1.1　试验动物　健康白色豚鼠,雌雄均可,体重300~500克,随机分组,每组8只,分为样品组、阴性对照组和阳性对照组[3]。
　　1.2　样品制备　试验材料奥美定由吉林富华医用高分子材料有限公司提供,称取样品4g加0.9%生理盐水20ml,置121℃浸提1小时。阴性对照组为0.9%生理盐水20ml;阳性对照组为5%甲醛溶液20ml。
　　1.3　试验试剂1.3.1　完全佛氏佐剂　按一定比例量取液体石蜡和羊毛脂混合均匀,灭菌后加0.05%卡介苗(BCG)备用。
　　1.3.2　取等量的完全佛氏佐剂与材料浸提液及等量的0.9%生理盐水和5%甲醛分别制备成混合乳化液。
　　2　试验方法2.1　采用ISO 10993-10:1995生物学评价中皮肤致敏试验的最大计量法(Magnusson & Kligman)。
　　2.2　在豚鼠背部剪毛4cm×6cm,常规消毒后于肩胛骨内侧从头向尾成对地注射6个点,每点注射0.1ml,分别为完全佛氏佐剂、被试液(0.9%生理盐水、材料浸提液、5%甲醛溶液)、完全佛氏佐剂与被试液的混合乳化剂。
　　2.3　试验第7天同区域剪毛,用10%十二烷基硫酸钠涂布各注射点,次日各注射点涂布相应的被试液。
　　2.4　于末次致敏后的第17天,在豚鼠腹部剪毛2cm×4cm,消毒后于皮内注射相应被试液0.1ml,注射后1小时、24小时、48小时观察注射点的情况。
　　3　试验结果各组试验动物注射点局部红斑、水肿记分(表1)。皮肤致敏试验以致敏率表示致敏的程度,即致敏率=注射点致敏数/总注射点数×100%,致敏率<8%,分度为Ⅰ,为无致敏性,通过试验计算各组致敏率(表2)。